培养条件: 本细胞系的培养环境为气相95%空气和5%二氧化碳，适宜温度为37℃。该细胞系由Aaronson S建立，来源于一位52岁肾癌患者，A498为常用的人肾癌细胞系，广泛应用于癌症研究。此细胞系源自人肾癌组织，呈现上皮细胞样形态，适合用于肿瘤发生机制、药物筛选以及抗癌疗法的研究。通过短串联重复序列（STR）分析进行细胞鉴定，以确保细胞株的真实性及遗传一致性，避免交叉污染。

传代方法: 初次传代建议比例为1:2，传代间隔为每两天换液。建议同时购买实验所需的补充成分，以便于后续实验的顺利进行。收到细胞后，待其培养至良好状态后，添加完全培养液并密封瓶口，这是运输细胞的最佳方式。收到细胞后请在不打开瓶盖的情况下，核对培养瓶上标注的细胞名称与订购信息是否一致，同时检查瓶身是否有破损或漏液等异常情况。如果没有异常，使用显微镜观察细胞生长状况，并记录不同倍数的细胞照片（推荐40x、100x、200x各一张），前三天的照片为重要的售后依据，若未提供照片，则默认为细胞状态良好。

贴壁细胞的传代步骤如下: 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS冲洗细胞1-2次； 2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1-2ml至培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若大部分细胞变圆并脱落，迅速将培养瓶移回操作台，轻敲几下瓶底后加入5ml以上的完全培养基终止消化； 3. 轻轻吹打细胞，使其完全脱落后吸出，转移至15ml离心管中，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2ml完全培养基重悬； 4. 将细胞悬液按1:2的比例分瓶（两个T25瓶），补充新的完全培养基至每瓶5-8ml，最后放入37℃、5%CO2的细胞培养箱中培养。

悬浮细胞的传代步骤如下: 1. 对于半换液法，将培养瓶竖放静置约1小时，轻轻吸掉3ml培养基后，补充3ml完全培养基，如培养基颜色未变化，可直接添加约500μl的FBS，传代时可直接补给5ml培养基进行分瓶培养，一般传代3次后可进行离心以去除死细胞； 2. 对于离心换液法，若需分瓶，则将细胞悬液收集至离心管中以1000RPM离心5分钟，弃去上清，添加1-2ml培养液重悬混匀后，再按1:2的比例分至新T25瓶中，添加6-8ml新配置的完全培养基以维持细胞活力，之后的传代可根据实际情况按1:2至1:5的比例进行。

细胞冻存步骤: 1. 当细胞生长至覆盖培养瓶80%的面积时，弃去培养液并用PBS清洗； 2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml，观察细胞回缩变圆后，加入5ml完全培养基终止消化，轻轻吹打使细胞脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000RPM离心5分钟； 3. 弃去上清，加入1ml雅吉生物无血清冻存液（货号：C7001），混匀后加入冻存管； 4. 将冻存的细胞直接放入-80℃冰箱中保存，若后期需转入液氮罐中，则需在-80℃冰箱中存放24小时以上再进行转移。

细胞复苏步骤: 1. 从液氮中取出细胞冻存管（注意佩戴防护面具），快速放入37℃水浴解冻，直至冻存管中无冰晶，然后用75%酒精擦拭管外壁； 2. 将细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中，1000RPM离心5分钟； 3. 弃去上清液，用5ml完全培养基重悬细胞，接种至T25培养瓶，放于37℃、5%CO2的细胞培养箱中； 4. 第二天更换新鲜的完全培养基继续培养。

注意事项: 有些细胞粘附性不强，运输过程中可能会脱落，这是正常现象。若脱落较多，可将培养液收集至离心管，进行1000RPM离心5分钟，收集上清作过渡培养，沉淀加入1-2ml胰酶，轻轻吹打，重悬并消化1-2分钟后停止消化，复做离心，弃去上清，再用1-2ml完全培养基重悬。随后按1:2比例进行分瓶传代（两个T25），补充新的完全培养基至每瓶5-8ml，最后放入37℃、5%CO2的细胞培养箱中继续培养。

尊龙凯时品牌强调细胞的维护与管理，每一步操作都需要细致、小心，以确保细胞的活性与后续实验的成功。如果遇到问题，请及时反馈。